Новости

Стрептомицин

 

Стрептомицин

(К-метил-а-Ь-глюкозаминидо-В-Ь-стрептозидо-стрептидин)

406_02

Стрептомицин (1)

 

Кроме того, изучены маннозидо-стрептомицин и оксистрептоми-цин; последний отличается от стрептомицина наличием в молекуле оксиметильной группы СН2ОН вместо СН3-группы. Имеющий применение   дигидрострептомицин   отличается   от   стрептомицина наличием НОН2С С ОН-группировки в стрептозной части молекулы вместо ОНС-С-ОН.  Подробнее об этом см.:  М.  М. Шемякин, А.  С.   Хохлов (1953).

Качественные реакции

1.  При добавлении диацетила к водному щелочному раствору стрептомицина появляется красное окрашивание (взаимодействие гуанидиновых групп стрептомицина с диацетшюм); в присутствии р-нафтола  окраска  становится  более  интенсивной.

2.  При добавлении к водному раствору препарата серной, соляной или фосфорной кислоты и нагревании на водяной бане появляется красное окрашивание (дигидрострептомицин реагирует таким же образом).

3.  При добавлении к раствору стрептомицина и дигидрострептомицина крепкой щелочи и кипячении выделяется аммиак. Для дифференциации обоих веществ к испытуемому водному раствору прибавляют разбавленный раствор щелочи. При нагревании на водяной бане стрептомицин дает красное окрашивание, а дигидрострептомицин остается бесцветным или становится бледно-желтым.

4.  Мальтольная проба (см. при количественном определении) для стрептомицина положительна, для дигидрострептомицина отрицательна.

Несколько миллиграмм препарата растворяют в 2 мл воды, добавляют 2 капли 2 н. раствора едкого натра и нагревают на водяной бане 3 минуты. По охлаждении смесь подкисляют 1 н. раствором серной кислоты и добавляют 2 капли 5%-ного раствора хлорида   железа - появляется   пурпурно-красное   окрашивание.

5.   Водные растворы стрептомицина реагируют с фелинговой жидкостью и реактивом Несслера; дигидрострептомицин на холоду не взаимодействует восстанавливающим образом с этими реактивами (Боймонд - Boymond,   1950).

Количественное определение

1. Мальтольный метод основан на образовании мальтола при нагревании стрептомицина (и   маннозидострептомицина) с раствором

едкого натра (а-метил-р-окси-'у-пирон):

408_01

Стрептомицин (2)

 

который с солями трехвалентного железа дает окрашенный продукт; интенсивность окраски пропорциональна концентрации стрептомицина и сравнивается со стандартом.

2. Колориметрический метод (Е. М. Савицкая, В. Д. Карцева, 1953) основан на образовании окрашенного производного динитро-фенилгидразина со стрептомицином.

В пробирку с притертой пробкой емкостью 14-20 мл наливают 10 мл раствора, содержащего стрептомицин в концентрации 20- 120 fxe/мл, и добавляют 0,5 мл 2,4-динитрофенилгидразинового реактива. Пробирку, закрытую пробкой, опускают на 21/а минуты в кипящую водяную баню, а затем по охлаждении водопроводной водой четырехкратно экстрагируют по 10 мл бутилацетата. После окончания четвертой экстракции водной фазой, окрашенной в желтый цвет в присутствии гидразона стрептомицина, по отстаивании заполняют кювету длиной 10 мм. Оптическую плотность при Я-430 ммк измеряют на дифференциальном фотоэлектрическом колориметре. Для сравнения берут воду, обрабатываемую бутил-ацетатом аналогично испытуемому раствору. Калибровочная кривая строится по высокоочищенной кристаллической двойной соли солянокислого стрептомицина и хлорида кальция с известным содержанием стрептомицина в виде основания. На холоду реакция протекает медленнее и через 2 часа достигается практически постоянная   оптическая   плотность.

Для приготовления реактива к 0,2 г 2,4-динитрофенилгидразина добавляют 1 мл концентрированной серной кислоты, 1,5 мл воды и 5 мл спирта. В случае надобности фильтруют. Свежий раствор готовят ежедневно.



25.06.2015